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柯萨奇病毒B IgM检测试剂盒

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品牌: 德国DRG
规格: 96T
货号: EIA5175
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最后更新: 2020-01-17 08:51
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产品详细说明
柯萨奇病毒B IgM检测试剂盒(酶联免疫法)

 

通用名称:柯萨奇病毒B IgM检测试剂盒(酶联免疫法)

英文名称:Coxsackie virus B IgM ELISA

产品规格96人份/T

产品货号:EIA5175

产品品牌:德国DRG


柯萨奇病毒B IgM检测试剂盒预期用途

柯萨奇病毒B IgM检测试剂盒可用于定性检测人血浆和血清中的柯萨奇病毒B(CoxB)IgM抗体。

 

柯萨奇病毒简介

柯萨奇病毒属于一种称为肠病毒的病毒,特别是它们是小核糖核酸病毒。它们分为A和B两大类。大多数柯萨奇病毒感染并不严重。它们通常仅引起轻微的体征和症状,例如发烧,皮疹,喉咙痛,关节痛和头痛。症状通常持续约一周。柯萨奇病毒感染最常发生在幼儿中。A组病毒与无菌性脑膜炎,感冒,急性出血性结膜炎和急性心肌病有关,B组与急性心肌炎和脊髓灰质炎样麻痹有关。


尤其与柯萨奇B型病毒相关的综合征是胸膜炎,也被称为博恩霍尔姆病或恶魔性癫痫病,表现为严重的胸膜胸痛,有时伴有腹痛和呕吐,自觉性脑膜炎,感冒以及心肌或心包感染。


最近的免疫化学技术已用于通过IgM的ELISA试验对CoxB感染进行早期诊断,作为近期感染的血清学标志。


柯萨奇病毒B IgM检测试剂盒检测原理

用来自组织培养的天然柯萨奇B病毒抗原包被微孔板,其中包含其主要亚型。在第一次孵育中,用稀释的样品处理固相,如果存在抗原,则捕获抗CoxB IgM。洗掉样品的所有其他成分后,在第二次孵育中,通过添加抗过氧化物酶(HRP)标记的抗hIgM抗体来检测结合的抗CoxB IgM。固相上捕获的酶作用在底物/色原混合物上,产生的光信号与样品中存在的抗CoxB IgM抗体的量成比例。


因此,样品中IgM的存在可以通过能够区分阴性和阳性样品的临界值来确定。在试验中直接在孔中进行IgG抗CoxB的中和,以阻止由于此类抗体在IgM测定中的干扰。

 

柯萨奇病毒B IgM检测试剂盒组成成分

名称

数量

成分

包被板 1×12×8

可拆,包被有来自组织培养的天然柯萨奇病毒B抗原

阴性质控 1×4ml

即用型,淡黄色。

阳性质控 1×4ml

即用型,绿色。

浓缩洗涤液 1×60ml

浓缩型(20×), 含PBS缓冲液.

酶联物 1×16ml

即用型,红色

底物液 1×16ml

含TMB

终止液 1×15ml

含0.3M的H2SO4

样本稀释液 2×60ml

即用型

中和试剂 1×8ml

含山羊抗hIgG。


实验所需材料不提供

1。 校准的微量移液器(1000、100和10ul)和一次性塑料吸头

2。 EIA级水(除臭或去离子水,用木炭处理以除去用作消毒剂的氧化性化学品)

3. 计时器

4. 吸水纸

5. 恒温培养箱

6. 酶标仪,450nm(读数)和620-630nm

7. 洗板机

8。 涡流混合器

实验前准备

1. 检查印在外部标签(主容器)上的试剂盒的失效日期。如果过期,请不要使用。

2. 检查液体成分是否未被可见的颗粒或聚集物污染。

3。 用无菌塑料移液器吸取少量的铬(TMB),以检查其是否为无色或浅蓝色。

4. 检查运输中是否没有破损,箱子(主容器)内没有液体溢出。检查包含微孔板的铝袋是否未刺破或损坏。

5。 溶解报告的校准物的内容。

6. 如上所述稀释20x浓缩洗涤溶液的所有内容物。

7. 让所有其他组分达到室温(约1小时),然后将所有液体试剂涡旋轻轻混合。

8。 按照制造商的说明,将ELISA恒温箱设置在+ 37℃并通过用稀释的洗涤液灌注来准备洗板机。设置正确的洗涤周期数(如在仪器验证中找到的那样)。

9. 检查酶标仪是否已打开,或确保在读数前至少20分钟将其打开。

10. 如果使用自动工作站,请打开电源,检查设置,并确保使用正确的测定规程。

11. 检查微量移液器是否设置为所需的体积。

12. 检查所有其他设备是否可用并准备就绪。

13. 如果出现问题,请勿继续进行测试并通知主管。

 

质量控制

每当使用试剂盒时,都要对质控品和校准品进行验证检查,以验证测定的性能是否符合IVDD指令98/79 / EC的预期和要求。

控制以下数据是否匹配:

校验

要求

空白孔

<0.100 OD 450nm值

阴性质控

消隐后<0.200平均OD 450nm值,

变异系数<30%

阳性质控

OD 450 nm> 0。500


如果测试结果符合上述要求,请继续进行下一部分。如果没有,请不要继续进行以下操作:

问题

校验

空白孔

>0.100 OD   450nm值

1。 在测试过程中没有污染铬/底物溶液

阴性质控

消隐后>0。200 OD 450nm值,

变异系数>30%

1。洗涤程序和洗板机设置是否符合资格预审研究的要求;

2.在使用前要使用正确的洗涤液并且已经对洗板机进行了底漆处理;

3.分析过程中没有做过任何错误(分配阳性质控而不是阴性质控);

4.没有由于阳性样品或酶联物的溢出而对阴性质控或其孔造成污染;

5.微量移液器没有被阳性样品或酶联物污染;

6.洗衣机针头没有被堵塞或部分阻塞。

阳性质控

<0。500 OD 450nm  

1.该程序已正确执行;

2.其分配没有做错(分配错误的质控);

3.洗涤程序和洗衣机设置是否符合资格预审研究的要求;

4。没有发生阳性质控的外部污染。

 

结果计算

如果测试有效,则通过阴性质控(NC)的平均OD 450 nm值通过下式确定的临界值(Co)计算结果:临界= NC + 0.250

重要说明:当结果计算是由ELISA自动化工作站的操作系统执行时,请确保使用正确的公式生成正确的结果解释。

 

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