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shRNA质粒制备

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所在地: 湖北 武汉
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最后更新: 2009-09-01 16:17
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公司基本资料信息
 
 
产品详细说明
技术简介: 近年来的研究表明,将与mRNA对应的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA(dsRNA)导入细胞,可以使mRNA发生特异性的降解,导致其相应的基因沉默。这种转录后基因沉默机制(post-transcriptional gene silencing, PTGS)被称为RNA干扰(RNAi)。编码shRNA的载体生产的siRNA制备质量可控性好,带有抗生素标记的载体可以在细胞中持续抑制靶基因的表达,持续数星期甚至更久,可以大量扩增。 早期的shRNA表达载体多采用RNA聚合酶III启动子,如人源U6、H1、7SK或鼠源U6启动子,后有部分研究报道了利用某些优化方案将RNA聚合酶II启动子引物shRNA表达载体中。以上特定的真核启动子在哺乳动物细胞内引导非编码性小RNA的转录,转录出的产物是经折叠形成的发夹状小RNA(ShRNA),shRNA在细胞内经Dicer酶切割成3端带有两个U突出的SiRNA,进而启动RNAi,介导基因沉默。 shRNA表达载体较之别的siRNA制备方案有着许多的优点,如制备质量可控性好,带有抗生素标记的载体可以在细胞中持续抑制靶基因的表达,持续数星期甚至更久,可以大量扩增等,使其受到越来越多科研工作者的青睐。 服务内容: 1. 一个载体编码一条ShRNA质粒表达服务 在完成对合个单条shRNA抑制效果的筛选后,可利用晶赛公司专利的多表达构建方案,将各有效的最多达六条shRNA构建在同一个质粒上。 2. 一个载体编码两条ShRNA质粒表达服务(一次完成载体构建,无表达单条shRNA载体) 当您已经筛得两条有效序列,或是在可靠文献中得到两条有效序列时,或是想同时封闭两个基因时,此一服务将是您的理想选择。 3. 一个载体编码四条ShRNA质粒表达服务(一次完成载体构建,无表达单条shRNA载体) 根据大部分文献报道及经验,通常四条siRNA中可以筛选出一条比较高效的siRNA序列。晶赛公司的四条shRNA质粒表达载体可以为您在最短地时间内完成一个载体编码四条shRNA的构建服务,从而可以避免筛选的巨大工作量,缩短时间周期,节省实验经费。 晶赛公司的前期近50次实验结果表明,49个四shRNA表达载体可以在mRNA水平抑制目的基因达90%以上。
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